Das Zweiblütige Veilchen ist von dem Ackerstiefmütterchen gut zu unterscheiden. Seine gelbe Blüte hat feine braune Streifen und seine Laubblätter sind nierenförmig. Die Nebenblätter sind einfach, beim Stiefmütterchen sind sie gefiedert.
Die Heilwirkung ist die gleiche, wie bei dem Stiefmütterchen.